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1.玻璃器皿的洗涤清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件,因此,玻璃器皿的清洗是实验前的一项重要准备工作。玻璃器皿无论是初次使用还是培养后重复使用,均需要进行清洗处理。清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗涤剂的类别和玷污程度等的不同而有所不同,现分述如下:

(1)新玻璃器皿的洗涤新购置的玻璃器皿含游离碱较多,应在酸溶液内先浸泡数小时。酸溶液一般用2%盐酸或洗涤液。浸泡后用自来水冲洗干净。

(2)使用过的玻璃器皿的洗涤

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1)试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉、去污粉等洗涤剂刷洗,然后用自来水充分冲洗干净。热的肥皂水去污能力更强,可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉和去污粉较难冲洗干净且常在器壁上附有一层微小粒子,故要用水多次甚至10次以上充分冲洗,或可用稀盐酸摇洗一次,再用水冲洗。将器皿冲洗干净后,将其倒置于铁丝框内或有空心格子的木架上,在室内晾干;急用时可盛于框内或搪瓷盘上,放烘箱烘干。玻璃器皿经洗涤后,若内壁的水是均匀分布成一薄层,表示油垢完全洗净;若挂有水珠,则还需用洗涤液浸泡数小时,然后再用自来水充分冲洗。装有固体培养基的器皿应先将培养基刮去,然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在2%煤酚皂溶液(来苏尔)或0.25%新洁尔灭消毒液内24h或煮沸0.5h,再用上法洗涤。带病原菌的培养物最好先行高压蒸汽灭菌,然后将培养物倒去,再进行洗涤。盛放一般培养基用的器皿经上法洗涤后,即可使用;若需精确配制化学药品或进行精确实验,要求用自来水冲洗干净后,再用蒸馏水淋洗三次,晾干或烘干后备用。

2)玻璃吸管吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管(包括毛细吸管),使用后应立即投入盛有自来水的量筒或标本瓶内,免得干燥后难以冲洗干净。量筒或标本瓶底部应垫以脱脂棉花,否则吸管投入时容易破损。待实验完毕,再集中冲洗。若吸管顶部塞有棉花,则冲洗前先将棉花挖出,然后再装入吸管自动洗涤器内冲洗。如果没有吸管自动洗涤器,也可采用以自来水水流进行冲洗的办法,必要时再用蒸馏水淋洗。洗净后,放搪瓷盘中晾干,若要加速干燥,可放烘箱内烘干。吸过含有微生物培养物的吸管应立即投入盛有2%煤酚皂溶液或0.25%新洁尔灭消毒液的量筒或标本瓶内,24h后方可取出冲洗。吸过带油液体的吸管,应先在10%氢氧化钠溶液中浸泡0.5h,去掉油污后再清洗。吸管的内壁如果有油垢,同样应先在洗涤液内浸泡数小时,然后再冲洗。

3)载玻片与盖玻片用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油,要先用皱纹纸擦去油垢,再在肥皂水中煮沸5~10min,用自来水冲洗,然后在稀洗涤液中浸泡0.5~2h,用自来水冲去洗涤液,沥干后浸于95%酒精中保存备用。使用时在火焰上烧去酒精。用此法洗涤和保存的载玻片和盖玻片清洁透亮,没有水珠。检查过活菌的载玻片或盖玻片应先在2%煤酚皂溶液或0.25%新洁尔灭溶液中浸泡24h,然后按上法洗涤与保存。

4)玻璃过滤器使用后及时用自来水冲洗过滤器表面的剩余物,然后用单蒸水浸泡,除去滤板内堵塞杂物。若用滤膜则将滤膜丢弃,过滤器加4mol/L盐酸浸泡12h以上,用自来水冲洗,再用单蒸水抽滤2次,双蒸水(或去离子水)抽滤冲洗,包装,121℃、0.103MPa高压蒸汽灭菌20min。也可用消毒液浸泡20min后,再按上述方法冲洗和灭菌。

2.玻璃器皿的包装为了灭菌后仍保持无菌状态,各种玻璃器皿均需包扎。空的玻璃器皿通常用旧报纸包装,一般用干热灭菌,若用湿热灭菌,则要多用几层报纸包扎,外面最好加一层牛皮纸或铝箔。

(1)培养皿的包装培养皿常用旧报纸包扎,一般以5~8套培养皿成一包,少于5套工作量太大,多于8套不易操作。包好后干热或湿热灭菌。如将培养皿放入金属(不锈钢)筒内进行干热灭菌,则不必用纸包,金属筒为一圆筒形的带盖外筒,里面放一装培养皿的带底框架,此框架可自圆筒内提出,以便装取培养皿。

(1)移液管的包装准备好干燥的移液管,在其粗头顶端塞一小段长约10mm的棉花,其作用是避免外界杂菌吹入管内,或避免将微生物吸出管外。棉花要塞得松紧恰当(若过紧,吹吸液体太费力;若过松,吹气时棉花会下滑),以吹吸时能通气而又不使棉花滑下为准。先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45°角,先折叠纸条包住尖端,然后在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来(附图1a),将上端剩余纸条折叠打结。如此包好的移液管可进行干热灭菌。如果有装移液管的不锈钢筒(附图1b),亦可将分别包好的移液管一起装入筒内,进行灭菌;若预计整筒灭菌的移液管可一次用完,亦可不用报纸包而直接装入筒内灭菌,但要求移液管管尖朝筒底,粗端在筒口,使用时,将筒卧放在桌上,用手将粗端抽出。

(2)试管和三角烧瓶等的包装试管管口塞以棉塞或通气的硅胶塞,然后在棉塞与管口或瓶口的外面用牛皮纸与粗棉线包扎好(如果能用铝箔则更好,可省去扎线的工序,且效果好),进行湿热灭菌。试管塞好塞子后也可一起装在铁丝框中,用大张报纸或铝箔将一框试管口做一次包扎,包纸的目的在于防止灭菌时棉塞潮湿及保存期灰尘浸入。若是盛有培养基的试管,应直立并扎成捆,以免灭菌时倾倒。三角烧瓶瓶口用棉塞或4~6层纱布,外加牛皮纸包扎。

(3)玻璃注射器的包装将内芯取出,与外套一起用牛皮纸或纱布包好;针头装入管底垫有少量棉花的小试管内,管口塞上棉塞。上述玻璃器皿可用高压蒸汽灭菌法,也可用干热灭菌法。如用干热法应注意控制温度在160℃,时间在2~3h内,以免烧焦棉塞及包装纸等。注意:任何已灭菌的器材,在使用前不能随意打开,一经打开则不再认为是无菌的。(张萍华)

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试管婴儿不能决定性别,否则的话就是设计试管婴儿了,中国是不允许的

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